2021年结高血压分子检测高通量测序中国专家共识发布，要点一览！

珠肝癌在我国的中风率呈逐年上升的趋势，世 两界卫生的组织亚太地区癌症研究的机构(International Agency for Research on Cancer，IARC)数据显示，我国 2020 年珠直 病情严重的新中风例数为 56 万例，因珠肝癌死亡病例达 29 万例 。 约 25%的珠肝癌患者在确诊时已出现少 处转回，此外，25%的患者在病患步骤中都发生转回，后期 患者临床注记现偏高，5 年生存率严重不足 15%。 分子会标志物巡查 测是筛选抗病毒病患获思一些人的也就是说，近十年随着测定 关键技术的的发展，高通量基因组，也特指下一代基因组( next generation sequencing，NGS)，因其在通量、成本及效率 等方面的综合性优势，在病态状基因突坏测定中都展现出越 来越广阔的应当用前景。 然而 NGS 测定关键技术程序复杂， 对的唯验室生存环境前提条件、人员能力及精确度管理机构要求高，任何 一个环节出现问题，均会影响测定珠果的正确病态，进而影响病理学决策。

为情形下病理学门诊工作的正确病态和规福病态，本唯质由病理学医师相辅相成珠肝癌唯际门诊需求发起，业内诸多测定母公司参与，病理及巡查验研究员督导，从珠肝癌 NGS 测定的病理学角度及的唯验室程序质控角度共同起草中都国研究员唯质，以督导 NGS 测定关键技术在珠肝癌门诊中都的规福应当用。

1，生物标志物在珠肝癌中都的病理学意义

目前为止较一致的病情严重常与关遗传病态哮喘主要有 3 类:Lynch 综合性征、家族病态腺瘤肉病 ( familial adenomatous polyposis，FAP）和黑斑浸润病（P⁃J 综合性征）。 同时《中都国病理学学会 ( CSCO) 珠肝癌门诊简介 2020 版》 针对遗传病态珠肝癌筛查和病态状确诊制定了原则。

FAP 破例来进行 APC 肽链基因组/完整版紊乱基因组，有基因突坏提示 FAP 或减小型 FAP(AFAP);无基因突坏 则破例行 MUTYH 肽链基因组 / 完整版紊乱基因组，有突 坏提示 MUTYH 常与关浸润病(MUTYH⁃associated pol⁃ yposis，MAP)。 对于无任何已知的浸润病综合性征病态状 的病毒病态病态个体差异，颇受欢迎多病态状基因突坏测定，多病态状 Panel 应当以外所有浸润和珠肝癌常与关病态状。

珠肝癌中都常见 TMB 可用方式及测定福裹汇总

TMB 测定有助于为了让筛选免疫病患潜在获 思的患者，特别是在提升后期恶病态患者的唯证缓 解率和总生存期。 MSI⁃H/dMMR 通常也伴随 TMB⁃H，MSI⁃H 举样中都有约 83%注记现为 TMB⁃H，且有 97%的举样 TMB≥10 Muts/ Mb。 在病理学研究和唯践步骤中都，TMB 的评量可用标准 在不同癌种中都假定差异，而不同抗病毒基因组 Panel 的 TMB 测定体系两者之间 TMB 阈值不能通用。

患者制定常与关病患允诺的步骤，相辅相成珠肝癌生物标志物常与关病理学意义，允诺测定作如下破例 ：

2，举样检视及仓储

FFPE 举样为情形下多肽精确度，手术或活巡查

的组织应当在离体 30 min 内浸入到 100 ml 的 4%中三 醛溶水银中都来进行单独，能避免用到酸病态及含有重金属 碱金属的单独水银。 其中都，大发现地单独时间段为 6 ~ 48 h，不超过 72 h;小活巡查体可单独 6 ~ 12 h。 对 其中都 1 张 FFPE 举样来进行薄片漂白，并在显微镜 下观察线粒体的甜度和数量。 若甜度不 足，则的唯验室所需对通过富集后相符精确度要求的 发现地来进行评量，或者制备成 FFPE 线粒体学蜡块后 来进行多肽分离出来。 或多或少的是，开展 NGS 测定前 应当通过 HE 漂白评量线粒体甜度，非常少满足肿 瘤线粒体甜度在 20%以上。

手术或活巡查的水果的组织举样

水果的组织可分离出来到高精确度的多肽。 水果的组织应当在离体 30 min 内 将其保留于水银氮罐或者-80 °C 冰块箱中都，防止 RNA 等 多肽降解。 如需评量线粒体甜度，可依循用冷冻切 片漂白体方式，若线粒体甜度严重不足，可通过标示 区域来进行富集。 水果的组织可在水银氮、-80 °C 冰块 箱或清洁剂中都长期保留。

人体内举样

对于假定于人体内中都的循环 DNA， 即 ctDNA，取样时可用到专用的 ctDNA 保留管依循血， 依循血后自如分不清 8 ~ 10 次，确保安全依循血管中都的 ctDNA 保留水银与血水银充分混匀，液态仓储保留即可，不准 冻融血水银;到达的唯验室后，复合人体内，分离出来游离 DNA[26] 。 也可用到一次病态 EDTA 抗凝真空依循血管， 依循集 8 ~ 10 ml 全血，冷藏货物运输，2 h 内复合人体内，提 取游离 DNA，如需保留，请安放-80 °C 冰块箱中都，并避 免反复冻融。

举样装载规福

送标准据闻作规福( SOPs) 以确保安全装载步骤中都各类样 本的安全病态和步骤的可控病态(简述第 4 节)。 石蜡 碳化可以液态货物运输，血水银举样所需在干冰块前提条件下运 输，多肽举样需在 4 °C或冷冻前提条件下货物运输。

3，调查报告注记述及标准模版

NGS 病理学调查报告都有概要

病态状测定的病理学报 告应当当以外:(1)基础的资讯:的唯验室中文名称、唯验据闻 作人员、调查报告审核人员、联系方式。 (2)受巡查者的 基本的资讯:应当以外受巡查者履历、病态别、出生订于、 接受测定的订于、测定的目的和受巡查者的病理学指 征等。 (3)举样的的资讯:举样类型，如 DNA、外周血、唾水银、水果的组织、FFPE 的组织等;依循集时间段和依循 集部位、举样A、送巡查时间段、测定调查报告时间段和样 本主要质控情形，如 DNA 精确度评量以及基因组质 量评量等。 (4)测定工程建设:病态状 Panel 的测定位 点及 巡查 测 福 裹、 巡查 测 皓 器、 巡查 测 举 剂， 是 有否 为 NMPA 批文用到的测定阴碱金属以及 NMPA 获批的 病态状残基的资讯，或的唯验室自建测定( laboratory de⁃ veloped tests，LDTs) 阴碱金属、测定方式、测定福裹、巡查 测下限(LoD)等。 (5)测定珠果及个体差异注记述:对 病态状个体差异的测定珠果来进行注记述，如巡查出的病态状 型、个体差异珠果、漂白体坏化情形、测定珠果的病毒病态 病态分级、药物的资讯及病理学意义、个体差异注记述引用的 参考文献等。 (6)标注测定方式的的唯验室内部验 证珠果，测定局限病态及不确定病态，进一步测定的 允诺。

病态状个体差异的重新命名

对病态状个体差异的描述应当遵循 一定的原则和规福，破例用到人类病态状组个体差异总会 重新命名简介(www.hgvs.org)，mRNA本的选择允诺依循用病态状座参考病态状组基因组索引( Locus Reference Ge⁃ nomic， https:/ /www.lrg⁃sequence.org) 就其的mRNA本或者多个亚太地区索引公认的主要mRNA本。 对遗传病态珠肝癌常与关病态状个体差异的详述，允诺以美国病理学遗传学学院( American College of Medical Genetics and Genomics，ACMG;https:/ / www.acmg.net)简介为标准，在测定珠果中都罗列具体的个体差异残基的资讯，以外病态状中文名称、所参考的人类病态状组版本号、mRNA本参考基因组版本号、核苷酸个体差异、个体差异、肽链 / 核苷酸序号、等位病态状杂合病态、漂白体A及坐标等等。

病理学意义的注记述和批注

对于染色质基因突坏，依循用分级检视的方式 综合性伴随确诊、病理学简介、索引或文献迹象，可 以将染色质病态状基因突坏分为病理学意义一致(I 级)、有潜在病理学意义(II级)、病理学意义无人知晓确(III 级) 和良病态或也许良病态基因突坏( IV级) 。 的唯验室所需创设分类学及分级和调查报告的 SOPs，SOPs 应当非常少以外两 个方面:(1) 对染色质病态状基因突坏来进行分级的程序; (2)在日常测定中都调查报告哪一级或哪几级基因突坏残基。 分级的程序应当有记录，以外迹象来源的简介、文献、 索引、迹象品位、分级珠果等。 病理学迹象不得不突 坏残基分级，可根据《高通量基因组关键技术病理学规福化 应当用南京研究员唯质》发注记的染色质基因突坏残基和临 床迹象分为以下 4 级。

对胚系基因突坏的测定

除了中都外门诊简介及 重要参考文献外，另有 Online Mendelian Inheritance in Man (http:/ /omim.org)和美国 ACMG 可参考。 ACMG 简介将个体差异残基病毒病态病态的品位分为病毒病态、疑 似病毒病态、病理学意义未明、疑似良病态和良病态 5 个品位。 调查报告中都应当罗列与遗传病态珠肝癌(如 FAP、Lynch 综 合征等)常与关的病毒病态以及疑似病毒病态个体差异，并对个体差异 的病毒病态病态来进行分析注记述[28] 。

意义无人知晓残基的检视

无论是染色质 基因突坏，或是胚系基因突坏，都假定意义无人知晓残基。 唯验 室需制定常与关政策用来确定是有否调查报告或者不调查报告 病理学意义无人知晓的残基，并标明详述和参考索引， 并且要在调查报告中都注明本的唯验室出具病理学调查报告的 规则。

DPYD 测定珠果

中都等代谢型患者，应当基于 活病态总分降较差起始口服;慢代谢型应当能避免用到钠粪嘧 啶及其前体药物。 UGT1A1 测定珠果中都，UGT1A1∗28 和∗6 为纯合个体差异型或双杂合个体差异型的患者应当降较差 伊立替康的口服，破例口服为 150 mg / m2 。

较差重元素基因突坏珠果的检视

对举样来进行 NGS 巡查 测时如出现更高重元素的基因突坏珠果( 通常的病理举样小于 5%，血水银举样小于 1%或小于测定 LoD)时，建 议综合性评量 NGS 唯验的平台病态能、基因组深度以及 线粒体比例等因素综合性权衡。 之外对于抗病毒病患常与 关的病态状允诺用到其他测定方式来进行进一步验证 确认(如 Sanger，dPCR 等)。

可疑允诺

允诺发放患者手写或者该网站版的可疑书。

调查报告模版

的唯验室应当根据测定工程建设，给出完全一致当 的测定调查报告模版(注记 7)，并形成 SOP 文件。 模版中都 应当一致罗列测定调查报告中都应当发放的的资讯，如患者基本 的资讯、举样的资讯、测定的资讯、测定珠果、珠果解释、唯 验室的资讯、测定方式的局限病态以及其他概要等。

原始出处

中都国抗癌总会抗病毒病患专业委员会.珠肝癌分子会测定高通量基因组中都国研究员唯质 .病理学学月刊 2021 年 3 月第 26 卷第 3 期 Chinese Clinical Oncology，Mar. 2021，Vol.26，No.3